三大检测方法查明呼吸道感染“真凶”

    □虞城县人民医院病理科孙丽

    呼吸道病毒感染多发于幼儿时期，是由各类病毒和微生物所致的主要侵犯咽喉的急性炎症的统称。据调查显示，进入呼吸道的异物以病毒最多见，约占70%~80%，其中有流感类病毒、呼吸道合胞病毒等。而细菌感染则仅占20%~30%，其中以溶血性链球菌最多见。不同病原菌所引起的上呼吸道感染往往有着不同表现与体征，临床上的治疗方式也存在着较大差异，因此，正确识别病原体对临床方案的制定有着重要意义。本文将为大家介绍呼吸道病原体的检测方法。

    血清抗体检测

    酶联免疫吸附法（ELI-SA）。将部分病毒或抗体包被到某些固相媒介面上后，将另一些病毒或抗体与某些酶相连接成酶标抗体。由于酶的催化分解概率很高，因此可以很好地增强化学反应效率。此方法简单快捷，对技术需求也不高，因而能够进行大批次的筛查，但因为假阳性概率较大，所以并不是首要选择。

    间接免疫荧光法（IIF）。细菌、组织切除或纯化后、生物特性明显的化学物质，均可用于测定自我抗体或作为病原体抗体的抗原基质，可同步检测各种抗不同类型组织或病原菌的抗体。将各种基体上监测到的数据互补，可以比较方便地获得一个更详尽的抗体谱学结果，此技术敏感性和特异性都很高。

    病原学检测

    病毒分离法。以口鼻咽分泌物接种Hep-2和MDCK细胞后，不断观察细胞的形态改变，若有更多的病灶发生时，判断为阳性；经盲传三代，若仍无病灶发生，则判断为阴性。此方法特异性较好，但其耗费时间过长，通常需要1~2周时间方可观测到病变，且分离阳性率亦较低。

    桥　联　酶　标　法（APAAP）。通过抽取鼻咽深部或下方的内分泌物来检测鼻咽部分泌物，制片后在一般光学显微镜下检查。此办法的所用技术设备简便，快捷，特异性强、在一般的光学显微镜下很易于辨认。

    直接免疫荧光法。把荧光素直接标记到相关的抗体上，并直接与一定的抗原反应，是一个快捷而精确的手段。但本法和以往使用的间接荧光免疫方法不同的是，它大大降低了对二抗的非特异性反应，因而增加了特异性，且检测时间也更短。标本在送入实验室2小时后即能获得结果，其设备只需要荧光显微镜，为及时检测病情、防止病毒扩散和制定合理的处理措施奠定了更可信的基础。

    分子生物学检测

    聚合酶链反应法（PCR）。它是近年来普遍用作临床治疗病原菌监测的一项手段，此方法的主要优势是灵敏、特异、迅速，可使一些无法培育的病毒得到测试，尤其是在与相关技术结合后功用更加强劲，准确率、敏感度和特殊性也大为加强。

    双扩增技术（DAT）。在PCR的基础上开发而成，扩增频率和敏感度均高于传统PCR的恒温扩增技术。有研究表明，它的敏感性远优于间接荧光法和直接病毒培养。