2月28日，美国和以色列对伊朗发动“先发制人”打击。3月1日上午，继联合军事打击已过去16小时，美国总统特朗普在大约3小时前宣布，伊朗最高领袖哈梅内伊“已死”。伊朗伊斯兰共和国通讯社随后证实，伊朗最高领袖哈梅内伊在美国和以色列对伊朗的袭击中殉职。伊朗政府宣布进行为期40天的全国哀悼。
哈梅内伊在与高级助手会面时殉职
据伊朗塔斯尼姆通讯社消息，哈梅内伊在领袖办公室的工作岗位上殉职，当时他正在履行职责。一名以色列高级官员告诉路透社，已经找到哈梅内伊的遗体。两名伊朗消息人士表示，在袭击开始前不久，哈梅内伊与伊朗国防委员会秘书阿里·沙姆哈尼以及伊朗最高国家安全委员会秘书、最高领袖顾问拉里贾尼在一个“安全地点”会面。两名美国消息人士与一名美国官员表示，美国和以色列在确认哈梅内伊与高级助手会面后，发起了此次打击。
据美联社消息，阿里·沙姆哈尼和伊朗伊斯兰革命卫队总司令穆罕默德·帕克普尔以及伊朗武装部队总参谋长穆萨维均在此次袭击中死亡。报道称，在哈梅内伊殉职后，将由伊朗总统佩泽希齐扬、司法部长和宪法监护委员会一名成员所组成的委员会领导国家。据英国广播公司报道，哈梅内伊的女儿、女婿等亲属也在此次袭击中遇难。报道援引伊朗伊斯兰革命卫队声明称，即将开始“历史上最具破坏性的进攻行动”，目标是“美国恐怖分子基地”和以色列。
以色列国防军3月1日称，已打死40名伊朗军事指挥官，伊朗政权“国防领导层已被消灭”。以军发表声明说，作为2月28日首轮打击的一部分，以色列空军在情报部门的指引下，袭击并打死在德黑兰多个地点聚集的7名伊朗最高安全领导层成员，其中包括伊朗武装部队总参谋长穆萨维。
伊朗向以色列和美军发起反击
据悉，美以在这次的联合军事行动中空袭了伊朗24个省份，德黑兰、伊斯法罕、库姆和克尔曼沙赫等伊朗主要城市均遭轰炸。在反击中，伊朗向以色列发射无人机和导弹，并对位于巴林、科威特和卡塔尔的美军军事设施实施打击。特朗普当天身处佛罗里达海湖庄园，没有公开露面，但发布了多条有关伊朗的社交媒体动态。他表示，美以对伊朗的轰炸将继续，“持续整周，或者在实现‘中东乃至全世界和平’这一目标所需的时间内持续下去”。
多国及国际组织谴责美以军事行动
这场冲突发生在美伊第三轮间接谈判的两天之后，各方原本计划3月2日在奥地利维也纳继续技术讨论。据《华盛顿邮报》报道，除在加勒比海域针对所谓毒品走私的军事行动外，特朗普在第二个任期内已对包括伊朗在内的7个国家发起军事行动。
美以发动军事打击后，联合国等国际组织、多国领导人和政府谴责美以军事行动，呼吁各方恢复对话以避免局势进一步升级。
联合国安理会就中东地区军事冲突升级举行紧急会议。联合国秘书长古特雷斯在发言中表示，《联合国宪章》为维护国际和平与安全奠定了基础，国际法和国际人道主义法必须始终得到尊重。他强调，持久和平只能通过和平手段实现，呼吁相关方立即停止敌对行动、缓和局势，并立即重返谈判桌，否则可能引发更大规模的冲突，给平民和地区稳定带来严重后果。
阿拉伯国家联盟发表声明说，阿盟对地区当前局势深表关切，呼吁国际社会迅速采取行动，缓和局势，以免该地区陷入日益严重的不稳定和暴力循环。
埃及总统塞西与多位阿拉伯国家元首通电话，表示埃及坚决反对并谴责任何侵犯阿拉伯国家主权、安全与稳定的行为，强调军事解决方案“不符合任何国家的利益”，并指出当前危机正威胁中东地区的和平与稳定，导致地区陷入混乱。他呼吁各方重回对话与外交轨道，以推动达成政治解决方案。
古巴、哥伦比亚、南非、葡萄牙、巴西、土耳其、利比亚、阿尔及利亚、阿塞拜疆、格鲁吉亚、乌拉圭、新西兰、秘鲁、墨西哥、智利和委内瑞拉等多国也对中东局势发展表达关切，呼吁各方优先选择对话和谈判，避免地区局势进一步升级。